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做ELISA标准曲线需要注意事项如下
更新时间:2022-10-19   点击次数:552次
  由于以渐近线开始和结束,曲线范围之外的数据可能会产生不的结果。更进一步说,试着在S中间标准曲线的线性范围内工作。一般来说,未知计算在曲线的线性范围内更。可以稀释超出标准曲线范围的样本,根据标准曲线计算浓度,然后根据初始稀释值乘以相应倍数。做ELISA标准曲线需要注意事项如下:
  1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
  2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
  3、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
  4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高性。
  5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
  6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
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